Добро пожаловать на сайт!
Корзина товаров: (0) товара на сумму 0 руб.
8 (499) 400-27-54

Тел.: 8 (499) 400-27-54
Отправить сообщение

Каталог
Следующая покупка на 5% дешевле

ЭФФЕКТ ПРИМЕНЕНИЯ ГИТАГАМП «ГИТАГАМП РУТИН – ЖЕЛЕЗО» ПРИ БЛЕОМИЦИН-ИНДУЦИРОВАННОМ ИНТЕРСТИЦИАЛЬНОМ ЗАБОЛЕВАНИИ ЛЕГКОГО У МЫШЕЙ

УДК 615.21/.26 

Лунин Владимир Глебович доктор биологических наук, профессор, заведующий лабораторией биологической активности наноструктур, Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава РФ seva1oo@yahoo.com Гитлин Илья Исаакович кандидат биологических наук, руководитель проекта, G&G Health seva1oo@yahoo.com 

Гитлин Исаак Григорьевич кандидат технических наук, руководитель научно-исследовательских работ, ЗАО «НПК ЭХО» seva1oo@yahoo.com 

Владимир Гл . Лунин доктор биологических наук, профессор, заведующий лабораторией биологически активных наноструктур ФГБУ НИИ эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава России seva1oo@yahoo.com 

Владимир Гл. Лунин доктор биологических наук, профессор, заведующий лабораторией биологически активных наноструктур ФГБУ НИИ эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи Минздрава России seva1oo@yahoo.com Илья Иванович Гитлин И.Г. к.б.н., руководитель проекта, G&G Health seva1oo@yahoo.com Гитлин И.Г. к.т.н., руководитель научно-исследовательской работы АО «НПК «ЭХО» seva1oo@yahoo.com

ЭФФЕКТ ПРИМЕНЕНИЕ НОВОГО ПРЕПАРАТА ГИТАГАМПЫ «ГИТАГАМПЫ РУТИНЫ - ЖЕЛЕЗО» ПРИ БОМИЦИН-ИНДУЦИРОВАННОЕ ИНТЕРСТИЦИАЛЬНОЕ ЗАБОЛЕВАНИЕ ЛЕГКОГО У МЫШЕЙ В СРАВНЕНИИ С ПИРФЕНИДОНОМ

ЭФФЕКТОМ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НОВОГО СОЕДИНЕНИЕМ «GITAGAMP РУТИН-ЖЕЛЕЗО» В INICE Индуцированный блеомицина полупродукты СРАВНЕНИЕ С ПИРФЕНИДОНОМ 

Аннотация . Авторы статьи показали, что исследование эффективности применения нового препарата «Гитагамп рутин — железо» и референс-препаратов пирфенидона, по динамике веса и выживаемости мышей после инстилляции блеомицина показало потенциальную возможность применения препарата «Гитагамп рутин — железо» в качестве протективного средства, переносимого тяжесть протекания. блеомицина. индуцированного интерстициального заболевания легких (ИЗЛ) мышей в поисках с пирфенидоном. 

Ключевые слова: блеомицин, интерстициальное заболевание легких мышей, «Гитагамп рутин – железо». 

Аннотация. Исследование эффективности нового препарата «Гитагамп рутинирон» и референтного препарата Пирфендони по динамике массы тела и выживаемости после инстилляции блеомшейцина показало потенциальную возможность использования «Гитагамп рутин-железо» в качестве защитного средства. это редкость индуцированного блеомицином интерстициального заболевания легких у мышей по сравнению с пирфенидоном. 

Ключевые слова : блеомицин, интерстициальное заболевание легких мышей, «Гитагам рутинирон». 

Введение . 

Идиопатический легочный фиброз (ИЛФ) имеет низкую заболеваемость (4–16 случаев встречаемости на 100 000 населения), но является смертельным заболеванием неизвестной этиологии. Эта патология широкого интерстициального процесса и высокой смертностью. Фиброзно-ассоциированные воспаления, пролиферация и воспаление фибробластов легких [11; 13]. Пациенты с выраженной склонностью к излечению от фиброза, что приводит к образованию рубцов в тканях и необратимому повреждению легких. 

В настоящее время применение трансплантации легких представляет собой лечение, вызывающее тяжелые последствия для здоровья пациентов, однако сопряжено с пересадкой иммуносупрессивных препаратов губительно для организма [16]. Существует несколько редких природных вариантов, в основном принадлежащих к семейной ИЛФ и общим однонуклеотидным полиморфизмом MUC5B, что является факторами, способствующими развитию ИЗЛ [13]. 14]. 

Один из факторов, который может привести к прогрессированию ИЛФ и другим интерстициальным заболеваниям легких ИЗЛ, является следствием окислительного стресса. Окислительный стресс - это дисбаланс форм кислорода (АФК) и доступной антиоксидантной защиты от них. В нормально-физиологическом состоянии АФК работает иммунная система для опосредования иммунного ответа и захвата патогенов 3, вызывающих воспалительные пути [15]. Отмена регулирования зазора АФК или условия, вызывающие накопление АФК, вызывают серьезные и неправильные потери тканями либо обусловлены, либо через изменение сигнальных путей[12]. 

Асбестоз и силикоз вызывают воспалительный процесс, стимулируют привлечение иммунных клеток, что, в свою очередь, приводит к повреждению, возбудимому АФК. Некоторые лекарственные образования возникают также остро у легких, например, у пациентов с диффузным альвеолярным поражением. Лежащее в основе воспаление, связанное с легочными сосудами, проницаемостью и гибелью эпителиальных и эндотелиальных клеток. Нарушение окислительного/антиоксидантного баланса важно при патогенезе острых поражений легких и остром дистресс-синдроме [9]. наиболее распространенными являются окружающие-генерирующие соединения в легочной ткани. Цитостатический агент блеомицина, например, комплекс железа, принимает электрон и перемещает его в O2, образуя радикалы O2- [8]. 

Результаты,[2; 5] встречающихся при встречах положительного исследования нового препарата (НП) на протекание бокового амиотрофического склероза (БАС), оказывают на один из выявленных вариантов действия НП. Влияния НП [1]хорошо иллюстрируется кривыми хемилюминисценции (ХЛ) цельной крови, выявления БАС[1] и снижением риска сверхвысоких концентраций перекиси крови. 

Возрастание окислительно-восстановительной активности (Пр/о), приводящее к накоплению сверхвысоких концентраций перекиси сосудов и всех серьезных групп растворимости кислорода в плазме крови с вытекающими последствиями. Снижение энергетического ресурса организма возникает в результате дефицита кислорода в клетках организма и, в последствии, сопровождается снижением ко-ферментов перуватдегидрогеназы[3; 6]. Эффективность иммунной системы и иммунный ответ организма как основной потребитель энергетического ресурса[7] существенно зависит от энергоресурса организма. 

Целью настоящего исследования являлась оценка эффективности лечения и заражения ИПЛ. 

Модель блеомицин-индуцированного ИЗЛ [9] позволяет выявить препараты, улучшающие легочные функции и естественное здоровье пациента. 

Материалы и методы . 

Объектом исследования являлся препарат «Гитагамп рутин – железо» (рутин-дигидроаскорбиновая кислота, цитрат железа (III), ЗАО «НПК ЭХО», серия: 04.02.2020, форма выпуска: 10% раствор). 

Все исследования проведены на мышах-самцах Black C57/6, массах массы тела 24-26 г, доходах от Питомника «Андреевка» ФГБУ «НЦБМТ» 4 РАМН (№ 4681762791 от 18.03.2020). Маркировка клеток, кодирующих пол животных, породу, предлагающая направление лекарств, название группы. Подбор животных в группе проводился методом случайной выборки, вес животных не должен вызывать сомнений не более чем на 10%. 

Все процедуры с обнаружением животных были исследованы и выявлены Институтской комиссией по признанию и удовлетворению животных на предмет наличия права на бесплодие к беспризорным животным[16]. 

Содержание, питание, содержание и выведение их из эксперимента по наличию в соответствии с требованиями «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР от 12.08.1977 г. N 755). 

Для кормления случаев применения экструдированных, полноценных, экологически чистых, сбалансированных лабораторных исследований кормов для животных, применения без консервантов и искусственных красителей на основе отечественного сырья по ГОСТ З 502.58-92 производства ООО «МСТ». 

Приготовление раствора «Гитагамп рутин – железо» 8 мг/кг: к 1 мл исходного раствора (концентрация 10%) добавляли 2 мл дистиллированной деионизированной воды. Получение растворенного введения внутрижелудочно в дозе 8 мг\кг массы тела животного. 

Приготовление раствора «Гитагамп рутин – железо» 16 мг/кг: к 2 мл исходного раствора (концентрация 10%) добавляли 1 мл дистиллированной деионизированной воды. Полученный раствор вводили внутрижелудочно 1 раз в сутки, в течение 7 дней (первое введение – через 24 часа после инфицирования) в дозе 4 мг\кг массы тела животного. 

В качестве препарата сравнения был использован Пирфенидон (5-метил-1-фенилпиридин-2 (1H)-он, MatrixScientific; 53179-13-8, 27.02.2020 г.). Приготовление препарата сравнения: до 40 мг Пирфенидона добавляли 4,0 мл деионизированной воды для получения исходного раствора Пирфенидона в концентрации 10 мг/мл. Пирфенидон вводили животным внутрижелудочно в дозе 100 мг/кг. 

Для пациентов с идиопатическим легочным фиброзом (ИЛФ) применяются препараты Блеомицин ((3-{[(2'-{(5S,8S,9S,10R,13S)-15-{6-Амино-2-[(1S)-3 - амино-1-{[(2S)-2,3-диамино-3-оксопропил]амино}-3-оксопропил]-5-метилпиримидин-4-ил}-13-[{[(2R,3S,4S, 5S,6S)-3-{[(2R,3S,4S,5R,6R)-4-(карбамоилокси)-3,5-дигидрокси-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил]окси} - 4,5-дигидрокси-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил]окси} (1H-имидазол-5-ил)метил]-9-гидрокси-5-[(1R)-1-гидроксиэтил ] -8,10-диметил-4,7,12,15-тетраоксо-3,6,11,14-тетраазапентадец-1-ил}-2,4'-би-1,3-тиазол-4-ил) карбонил]амино}пропил)(диметил)сульфоний, «Ниппон Кайяку Ко., Лтд.», Япония, 480642, 04.2018 г.). Приготовление раствора Блеомицина (БЛМ): до 50 мг (1,5 ед/мг) БЛМ приливают 31,25 мл раствора 0,9% хлорида натрия для получения раствора 1,6 мг/мл. Раствор БЛМ хранится 5 при -20 ± 4 °С в аликвотах. Одной внутритрахеальной инстилляции 50 мкл (2,0 мг/кг с объемом дозирования 1,25 мл/кг исходного раствора; объем 50 мкл дополняли 0,9% раствором). 

Индуцированное БЛМ среди легких у мышей является хорошо документированной моделью интерстициального заболевания легких у мышей. Эта модель используется для исследования выявления противовоспалительных и антифиброзных лекарственных средств для включения легочного фиброза. 

Раствор БЛМ вводили животным всеми дозами интратрахеальной инстилляции в 1-ые сутки с использованием катетера BDInsyte 20G в шприцах Norm-JectTuberkulin объемом 1 мл в дозе 50 мкл. Дизайн исследования представлен в Таблице 1. 

Таблица 1. Характеристика природных групп животных.

Проводилось ежедневное наблюдение за поведением и общим состоянием здоровья животных. Суточная масса тела учитывалась с 1-х до 26-ти суток. Животных ежедневно осматривают во время развития болезни на предмет изменения в поведении общего состояния здоровья. Эвтаназию и извлечение легких проводили через 120 часов после последнего введения препарата животным на 26-е сутки. Легкие каждую мышь извлекали, взвешивали, промывали раствором 0,9%-ным NaCl и помещали в 10% нейтральный раствор формы (НФИЗЛ). 

Стандартный статистический анализ выполнения программного обеспечения Microsoft Excel.  

Результаты исследования . 

Стандартная модель БЛМ-индуцированного интерстициального заболевания имеет типичные легочные конечные проявления для воспалительной и фиброзной фазы 7 и 14 дней. С целью исследования «Гитагамп рутин – железо» и пирфенидона на БЛМ-индуцированный легочный фиброз, мышам вводили внутрижелудочно «Гитагамп рутин – железо» (8 мг/кг и 16 мг/кг) один раз в сутки с 1 по 21 день после инстилляции БЛМ. Пирфенидон вводили внутрижелудочно внешне с 7 суток после инстилляции БЛМ. Затем определяли массу животных с 1-ых по 26-е сутки (рис.1). 

Рисунок 1. Динамика веса мышей по группам. 

Примечание: при отклонении веса мышей на 10 % от среднестатистического значения - результат не учитывался. 

Анализ динамики веса (рис.2) в течение 26-и дней после инстилляции БЛМ, показал, что между испытуемыми нагрузками. Мыши, получившие БЛМ, начали терять вес на 7-й день, гибель при этом не отмечалась. Тенденция веса была меньше в группах получавших «Гитагамп рутин – железо» (рис. 2А и Б) и Пирфенидон (2Б). По инструкции «Гитагамп рутин – железо» в дозе 8 мг/кг гибель животных не измерялась. 

Таким образом, мыши, получавшие «Гитагамп рутин – железо» в дозе 8 мг/кг, принимаемые с 1-го дня, имели значительное увеличение массы тела (рис. 2А). 

Статистический анализ модели показал значимую динамику в динамике веса между экспериментальной БЛМ (отрицательный контроль) и таблетку БЛМ + «Гитагамп рутин – железо» 8 мг/кг при уровне переносимости р <0,001. 

В группе мышей, получавших «Гитагамп рутин – железо» в дозе 16 мг/кг на 5-е, 6-е и 16-е сутки фиксировалась гибель животных. При этом уровень смертности в группе БЛМ на фоне препарата «Гитагамп рутин – железо» 16 мг/кг фруктов 30%. 

При оценке веса мышей в группе БЛМ + «Гитагамп рутин – железо» 16 мг/кг и у массовых животных в группе БЛМ (отрицательный контроль) наблюдали достоверную концентрацию (p<0,001). Применение группы БЛМ + «Гитагамп рутин – железо» 8 мг/кг и БЛМ + «Гитагамп рутин – железо» 16 мг/кг Разница в весе животных не является расходой (p>0,05). 

Увеличение веса мышей под появлением пирфинидона на модели индуцированного BLM фиброза легких наблюдалось с 12-х по 26-е сутки, при обнаружении с обнаружением контроля BLM (отрицательный контроль) наблюдались показатели в динамике веса на уровне симптомов p<0,05 ( рис. 2). 

На 26-е сутки у мышей извлекали легкие с трахеей и взвешивали. 

Вес легких представлен на рисунке 3. 

Рисунок 3. Вес легких мышей. 

В отрицательной группе контроля БЛМ наблюдалось увеличение среднего веса легких мышей по сравнению с интактной контрольной группой (p<0,001). Средние весовые группы легких мышей, получивших на 7-е сутки Пирфенидон выше по сравнению с интактной группой животных, но больше меньше, чем в группе отрицательного контроля БЛМ (p>0,05). Значимая разница между контрольной группой БЛМ и весом мышей, получающих препарат «Гитагамп рутин – железо» в дозе 8 мг/кг (р<0,001) и 16 мг/кг (р<0,01). 

Таким образом, исследование препарата «Гитагамп рутин — железо» и применение сравнения пирфенидона в весу мышей и масс легкого показало, что препарат «Гитагамп рутин — железо» в дозе 8 мг/кг был достаточно рассмотрен в отношении BLM-индуцированного легочного фиброза. Высокая доза (16 мг/кг) Препарат, вероятно, вызывает токсическое действие на животных, о чем свидетельствует гибель животных (30%). Применение препарата Пирфенидона с 7-го по 21-е сутки обострения состояния здоровья по сравнению с числом БЛМ (отрицательный контроль) к 26-ым суткам наблюдения при p<0,05. 

Выводы. На основании проведенного исследования моделей БЛМ-индуцированного интерстициального заболевания мы выявили потенциальную возможность использования препарата «Гитагамп рутин – железо» в дозе 8 мг/кг в качестве протективного средства, вызывающего острое образование соединительной ткани при блеомицининдуцированном интерстициальном заболевании легких. 

Результаты о действии препарата «Гитагамп рутин-железо», полученного на экспериментальной модели легочного фиброза in vivo, 9 убытков за периодичность проведения исследований препарата. 

Авторы статьи выражают глубокую признательность коллективу Лаборатории иммунологии ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» под родителями Исааевой Е.И. 

Литература :

  • 1.Гитлин И.Г., Гольдберг Е.З. Неврология, психиатрия и оксидативный стресс. Защитные свойства «Гитагамп – Рутин Железо (ГРуИ)» // Журнал международной медицины, 2013. - № 2 (3). – С. 101-106.
  • 2.Гитлин И.Г. Нейродегенеративные заболевания. Опыт лечения амиотрофического склероза // Дневник казанской медицинской школы, 2015. – Т.1. – Вып. VII. – С. 72-76.
  • 3. Гитлин И.Г. Особенности исследования тонуса мышечной системы на нарушение энергетического баланса и коррекции его состояния // Медицинский советник, 2015. - №5. – С. 19-21.
  • 4. Гитлин И.Г. Патент РФ 2309740, Евразийский патент 0166466, Китай патент ZL80033434.X, CA2659914 Канада США.
  • 5. Захарова М.Н., Народитский Б.С., Логунов Д.Ю., Гитлин И.Г. Изучение активности антиоксидантов в патогенезе бокового амиотрофического склероза // «Практическая медицина», 2012. - № 1(56). – С. 186-187.
  • 6. Кукес В.Г., Гитлин И.Г. Персональная медицина и окислительно-восстановительный гомеостаз // Лекарственные препараты и опасная фармакотерапия, 2014. - №2. – С. 23-25
  • 7. Тухватулин А.И., Гитлин И.Г., Калюжин О.В характеристиках состава клеточных стенок BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM и SACCHAROMYCES CEREVISIAE активировать транскрипционный фактор NF-κB при попадании С Toll-подобными рецепторами IN VITRO // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье», 2013. - № 1. – С. 27-31.
  • 8. Баст, Везелер, Хенен и Хартог. Окислительный стресс и антиоксиданты при интерстициальном заболевании легких // Curr Opin Pulm Med, 2010. - № 16(5). – Р. 516-20.
  • 9. Дайэнн М. Уолтерс, Стивен Р. Клибергер. Мышиные модели индуцированного блеомицином легочного фиброза // Текущие протоколы в главе фармакологии, 2008. - № 5(1) - Р 538 - 46.
  • 10. Имре Нот и др. Генетические варианты, ассоциированные с предрасположенностью к идиопатическому легочному фиброзу и смертностью: полногеномное ассоциативное исследование // Lancet Respir Med, 2013. - № 1(4). – Р. 309-317.
  • 11. Ледерер Д.Дж., Мартинес Ф.Дж. Идиопатический фиброз легких // N Engl J Med, 2018. - № 378(19). – Р. 1811-23.
  • 12. Мария Магаллон,1,2 Мария Мерседес Наварро-Гарсия, Франсиско Даси. Окислительный стресс при ХОБЛ // J Clin Medv, 2019. - № 8(11). – Р. 2015 – 25.
  • 13.Сейболд и др. Общий полиморфизм промотора MUC5B и легочный фиброз // NEngl J Med, 2011. - №364(16). – Р.1503-12. 10
  • 14. Сингер и др. Синдемики и биосоциальная концепция здоровья // Ланцет, 2017. - №389(10072). – Р. 941-950.
  • 15. Слимен и др. Активные формы кислорода, тепловой стресс и окислительное повреждение митохондрий // Международный журнал гипертермии, 2014. – Vol.30. - Р. 513-523.
  • 16. Титман А., Роджерс К.А., Бонсер Р.С., Баннер Н.Р., Шарплс Л.Д. Специфическое преимущество трансплантации легких для выживаемости у взрослых: национальное когортное исследование // American Journal of Transplantation, 2009. – № 9 (7). – Р. 1640-49 гг.

Рекомендации:

  • 1.Гитлин И.Г., Гольдберг Э.З. Неврология, психиатрия и оксидативный стресс. Защитные свойства препарата "Гитагамп - Рутин Железо (ГРуИ)" // Международный медицинский журнал, 2013. - № 2 (3). - С. 101-106.
  • 2. Гитлин И.Г. Нейродегенеративные заболевания. Опыт лечения амиотрофического склероза // Дневник Казанской медицинской школы, 2015. - Т.1. - Проблема. VII. - С. 72-76.
  • 3. Гитлин И.Г. Особенности влияния тонуса мышечной системы на нарушение энергетического баланса и методы его коррекции // Медицинский советник, 2015. - №5. - С. 19-21.
  • 4. Гитлин И.Г. Патент РФ 2309740, Евразийский патент 0166466, Патент Китая ZL80033434.X, CA2659914 Канада США.
  • 5. Захарова М.Н., Народицкий Б.С., Логунов Д.Ю., Гитлин И.Г. Изучение роли антиоксидантов в патогенезе бокового амиотрофического склероза // «Практическая медицина», 2012. – № 1 (56). - С. 186-187.
  • 6.Кукес В.Г., Гитлин И.Г. Персонализированная медицина и окислительно-восстановление гомеостаза // Лекарства и рациональная фармакотерапия, 2014. - №2. - С. 23-25.
  • 7. Тухватулин А.И., Гитлин И.Г., Калюжин О.В. Изучение способности состава клеточных стенок BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM и SACCHAROMYCES CEREVISIAE активировать транскрипционный фактор NF-κB при взаимодействии с Toll-подобным ИН рецептором «Человек и его здоровье». », 2013. – № 1. – С. 27-31.
  • 8. Баст, Веселер, Хенен и Хартог. Окислительный стресс и антиоксиданты при интерстициальном заболевании легких // Curr Opin Pulm Med, 2010. - № 16(5). – Р. 516-20.
  • 9.Дайэнн М. Уолтерс, Стивен Р. Клибергер. Мышиные модели индуцированного блеомицином легочного фиброза // Текущие протоколы в главе фармакологии, 2008. - № 5(1) - Р 538 - 46.
  • 10. Имре Нот и др. Генетические варианты, ассоциированные с предрасположенностью к идиопатическому легочному фиброзу и смертностью: полногеномное ассоциативное исследование // Lancet Respir Med, 2013. - № 1(4). – Р. 309-317.
  • 11. Ледерер Д.Дж., Мартинес Ф.Дж. Идиопатический фиброз легких // N Engl J Med, 2018. - № 378(19). – Р. 1811-23.
  • 12. Мария Магаллон,1,2 Мария Мерседес Наварро-Гарсия, Франсиско Даси. Окислительный стресс при ХОБЛ // J Clin Medv, 2019. - № 8(11). – Р. 2015 – 25. 11
  • 13. Сейболд и др. Общий полиморфизм промотора MUC5B и легочный фиброз // NEngl J Med, 2011. - №364(16). – Р.1503-12.
  • 14. Сингер и др. Синдемики и биосоциальная концепция здоровья // Ланцет, 2017. - №389(10072). – Р. 941-950.
  • 15. Слимен и др. Активные формы кислорода, тепловой стресс и окислительное повреждение митохондрий // Международный журнал гипертермии, 2014. – Vol.30. - Р. 513-523.
  • 16. Титман А., Роджерс К.А., Бонсер Р.С., Баннер Н.Р., Шарплс Л.Д. Специфическое преимущество трансплантации легких для выживаемости у взрослых: национальное когортное исследование // American Journal of Transplantation, 2009. – № 9 (7). – Р. 1640-49 гг.